细胞旋转培养仪-三维细胞培养-杭州市旋转细胞培养

       作为一种更---的替代方法，三维（3d）的细胞培养方法，研究人员提供研究细胞生长和分化的条件下，紧密地在体内的情况类似，细胞形态和细胞环境方面的可能性。目前，三维培养模式正在生物医学研究的许多领域开始应用，因为他们提供了比2d培养模式一个更接近体内的环境。2d培养技术的时代正在走向---的培养系统在3d。

rccs旋转三维细胞培养系统的特点主要：

1、允许在一个三维空间的球体内共培养多种细胞

2、容器(存储营养液及细胞)在旋转时仅有较小的剪切力，悬浮细胞培养旋转速度，因此导致的湍流非常小，便于---

3、具有高营养素传质特点，可预防细胞

4、容器转速可通过转速表进行任意调整

细胞传代的一般方法？

       开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(mem-0.2%lh 培养液或mem 培养液或199 等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血x清、庆大溶液（1 万单位）、7.5％nahc03 溶液、0.25％胰蛋白酶、pbs 洗液。

      用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至

少15 分钟高压灭菌)、c02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱

      操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态---，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可x疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制mem-0.2%lh 培养液100ml 内，加入灭活小牛血x清10m1，庆大溶液0.3m1，旋转细胞培养系统，7.5%碳---钠溶液3ml。（仅供一般参考）。---细胞；先用pbs 洗液冲洗细胞表面1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使---液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1 细胞培养液吹打分散细胞，青岛市旋转细胞培养，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。