发布单位:苏州乾芸仪器科技有限公司 发布时间:2022-6-8
phenodrive 作为一款人工合成的、非动物源性的新一代细胞、组织培养用基质胶(基质凝胶),与传统的自动物体提取的基质胶相比具有哪些优势呢?这里我们做一个简单、主要的总结如下:
传统基质胶
01 基---于动物源性的产品;
02 可能含有非预期的、有害的外来污染物;
03 现有产品使用过程相对比较复杂;
04 存在生物化学和地形特征的批次间差异;
05 存储不稳定;
06 产品单一, 无法满足用户的需求;
07 重组层粘连蛋白和纤连蛋白仅适用于某些类型的细胞, 不稳定且昂贵;
08 部分产品只能在低温条件下溶解,且较佳培养时间较短;
09 聚鸟氨酸通常与层粘连蛋白结合使用,主要限于神经元细胞;
合成基质胶
01 合成的非动物源性的产品;
02 所有化学成分均可控;
03 使用非常方便, 水、---、培养液等均可以溶解;
04 人工合成, 化学成分稳定, 批次间一致性较好;
05 性能稳定, 低温可存储至少12个月,紫外线照射不影响;
06 产品范围较广, 可满足几乎所有已知细胞系应用需求;
07 可用于无培养;
08 适用于 2d 表面培养耗材、微孔支架以及直接加入培养液;
09 能够模仿大多数组织的细胞外基质或上皮和内皮基底膜的网状结构;
10 能够以高度受控的方式向细胞展示生物配体,无论是在间距还是密度方面;
11 能够以受控和可的方式培养细胞并保留其表型而无需更改实验方案;
12 与现有的显微镜、成像技术以及常规的染色等应用方案兼容;
13 在旋转条件下悬浮形成3d细胞结构, 或与其他生物材料结合用于3d打印;
问:如何使用phenodrive---末?
答:在---或任何水介质中溶解, 将基质粉末稀释至0.01mg/ml至0.1mg/ml的浓度,在ph值7.4 的无菌缓冲溶液中, 或在75% ---(用于快速涂布)中并过滤。
问:如何使用phenodrive对96孔板或24孔板进行涂布?
答:使用移液管将重组液注入各孔(96孔50微升, 24孔200微升)并在无菌条件下通过溶剂蒸发进行实现涂层(建议紫外线照射环境)。蒸发时间将根据基质、浓度和/或体积而变化, 并在干燥后进行清洗。首先,在制备有机纳米纤维方面,用于静电纺丝的天然高分子品种还十分有限,对所得产品结构和性能的研究不够完善,终产品的应用大都只处于实验阶段,尤其是这些产品的产业化生产还存在较大的问题。建议无接种细胞, 可在细胞粘附后(如播种后3小时左右)添加。
问:如何存储phenodrive?
答:phenodrive以---末形式进行销售,可方便地在水溶剂中进行重组。---末可在4°c下保存至少6个月, 重组的溶液可在 -20°c 下保存并在冷冻后3个月内使用。
问:如何使用phenodrive对培养支架进行涂布?
答:应准备适当容量的移液管以---足够量的重组溶液,所需的体积可根据支架的尺寸、孔隙率、化学成分和膨胀特性决定 (如使用---, 支架可能会暂时膨胀, 同时应考虑与支架物理化学特性相关的因素)。
问:phenodrive在悬浮细胞培养中如何使用?
答:通过对粉末重组的方式将phenodrive溶解在对要培养的细胞类型具有特---的无组织培养基中 , 将所得溶液与细胞悬液混合以达到0.001%至1%(v / v)的终浓度, 具有细胞悬液的典型混合物的变化范围为40,000个细胞/ml至1,000,000个细胞/ml, 并在温和的旋转条件下于室温或37°c孵育20分钟照常播种细胞。---是近年来,随着纳米技术的发展,静电纺丝技术获得了快速发展,---的科研界和工业界都对此技术表现出了---的兴趣。
问:1mg的phenodrive 粉末可以涂布多少个微孔?
答:我们的标准包装是1mg/ 瓶, phenodrive 粉末进行重组后, 其溶液可以涂抹1块96孔板或1块24孔板 。
phenodrive---末的使用方法:
与传统的培养基质胶相比, 我们的合成基质胶使用过程---简单, 在室温下即可实现重组使用, 这里就 phenodrive的标准应用流程介绍如下:
由于phenodrive 是以无菌---末状态进行存储的, 因此在使用时需要对其进行重组。实验人员可以根据需求,取适量的粉末将其溶解进水、---或培养液中, 这个过程非常简单, 待其溶解后得到无色、透明液体经过滤后即可准备用于培养 , 这一过程即重组。人的大多数组织、器在形式和结构上与纳米纤维类似,这为纳米纤维用于组织和的修复提供了可能。重组后的液体可在-20℃ 的低温下保存3至少3个月。
对于这类耗材表面的涂布应用, 通常建议将phenodrive ---末溶解进75% 的---中, 按要求的浓度进行重组, 将经过滤的重组溶液浇铸在需要涂布的器皿表面,并在无菌的环境下让其自然蒸发(建议紫外线照射的无菌环境下), 待溶剂蒸发尽后, 即在器皿表面留下一层透明的薄膜,即完成涂布的过程。但是,从科学基础来看,这一发明可视为静电雾化或电喷的一种特例,其概念可以追溯到1745年。
建议:在无情况下种植细胞, 待细胞粘附后再添加, 比如在细胞种植3小小时后。
如果采用---溶液进行重组, 应---所使用的聚合物支架不溶于--- 。按照粉末重组步骤, 然后用移液器移取足够的重组溶液将支架完全覆盖, 同样采用自然蒸发的方法在支架的表面及空期间形成一层透明的薄膜。
溶解待培养细胞类型的无组织培养基中的phenodrive, 方法是按照粉末步骤配置适当浓度的重组透明重组溶液,再将从组后的溶液与细胞悬浮液混合, 以达到0.001% ~1%(v/v)的终 phenodrive 浓度。细胞悬浮液的典型细胞浓度是40000个/ml ~1000000个/ml。静电纺丝技术的发展方向静电纺丝技术在构筑一维纳米结构材料领域已发挥了非常重要的作用,应用静电纺丝技术已经成功的制备出了结构多样的纳米纤维材料。